ETAPAS DE RECUBRIMIENTO ELISA
Existen algunas variaciones en los protocolos de recubrimiento de placas, pero normalmente implican las siguientes etapas:
Día 1
- Añadir solución de recubrimiento (por ejemplo, anticuerpo o antígeno)
- Incubación durante la noche, normalmente a temperatura ambiente
Día 2
- Aspirar (eliminar la solución de recubrimiento por succión)
- Lavar 3 veces con tampón de lavado (paso no obligatorio en todos los protocolos)
- Dispensar solución de bloqueo
- Incubar, típicamente 1-3 horas
- Aspirar (eliminar la solución de recubrimiento por succión). ¡El volumen residual es crítico en este paso!
INSTRUMENTOS RECOMENDADOS PARA RECUBRIMIENTO ELISA
En el nivel más básico, una pipeta multicanal es suficiente para recubrir una sola placa. Sin embargo, el recubrimiento de ELISA se aplica típicamente a muchas placas a la vez y normalmente es un proceso de producción. Por lo tanto, la automatización es muy deseable.
El recubrimiento de placas es un proceso exigente. La mayoría de las demandas provienen del hecho de que es un proceso de producción, lo que implica la preparación de muchas placas por día. Las demandas más importantes son:
- Rendimiento: Puede variar desde unas pocas docenas de placas por día para ensayos ELISA caseros hasta cientos o incluso miles de placas por día para fabricantes de kits. Para lograr este rendimiento, se requiere un lavador de microplacas muy rápido.
- Manejo confiable de ingredientes problemáticos: los reactivos utilizados en el recubrimiento de placas pueden ser problemáticos, ya que pueden obstruir las finas agujas que se encuentran típicamente en los lavadores de microplacas (por ejemplo, tampones que contienen altas concentraciones de sal o azúcar) o producir grandes cantidades de espuma (por ejemplo, tampones de lavado que contienen detergente o soluciones de proteínas).
- Bajo volumen residual: esto es de suma importancia cuando se elimina el reactivo de bloqueo, ya que cualquier residuo interferiría con el ensayo real y las etapas de lavado en las placas.
- Fácil configuración: el tiempo es oro cuando se procesan grandes cantidades de placas. Por lo tanto, es importante comenzar su trabajo diario lo antes posible.
- Fácil mantenimiento: de manera similar, es importante mantener bajo el tiempo y el dinero que se gastará en mantenimiento, y evitar largos tiempos de inactividad en caso de falla.
El sistema de recubrimiento de placas Zoom HT satisface todas las demandas de recubrimiento de placas:
- Alto rendimiento gracias a sus apiladores integrados y diseño de un solo raíl: puede recubrir o bloquear hasta 330 placas/hora, y lavar (3x) hasta 190 placas/hora.
- La obstrucción se evita gracias al gran diámetro de sus agujas de dispensación y aspiración y a las rutinas automatizadas de enjuague y limpieza.
- La formación de espuma se evita gracias a la capacidad de optimizar la posición y la velocidad de dispensación, y la posibilidad de añadir continuamente un reactivo antiespumante a la trampa de residuos líquidos.
- Volúmenes residuales extremadamente bajos gracias al posicionamiento 3D de las agujas de aspiración y a su potente sistema de vacío con un caudal constante y estable.
- La configuración y el apagado diarios normalmente implican sólo ejecutar las rutinas integradas de enjuague y limpieza; la gestión de residuos se simplifica extremadamente gracias a su trampa de residuos de vaciado automático, con la adición automática de reactivo de esterilización, si es necesario.