Si bien los nombres pueden ser similares, un luminómetro debe distinguirse de un fotómetro y un medidor de luz:
- El fotómetro es un término muy amplio que incluye cualquier dispositivo que mida la luz, incluidos luminómetros, medidores de luz, espectrofotómetros y otros.
- El luxómetro también es un término amplio, pero normalmente se refiere a un pequeño dispositivo utilizado en fotografía para medir la intensidad de luz ambiental.
Luminómetros de Berthold Technologies
Berthold Technologies es pionera y líder del mercado en la detección de luminiscencia. Aquí tiene los principales tipos de luminómetros que ofrecemos. A continuación encontrará más información sobre el principio de un luminómetro y los diferentes tipos de luminómetros.
Principio de un luminómetro
Para poder medir las cantidades más pequeñas de luz, los luminómetros utilizan un tubo fotomultiplicador (PMT). Un tubo fotomultiplicador amplifica en gran medida las señales entrantes, haciendo que las señales débiles sean detectables. El principio de funcionamiento de un PMT es el siguiente:
- Los fotones que golpean un fotocátodo en la ventana de entrada del PMT producen electrones como consecuencia del efecto fotoeléctrico.
- Esos electrones son acelerados por un campo de alto voltaje y multiplicados en número dentro de una cadena de dinodos por el proceso de emisión secundaria.
- Los electrones amplificados finalmente llegan al ánodo, que está conectado a un circuito de procesamiento de salida.
- El circuito traduce la señal entrante en una señal de salida, que puede ser un pulso (si el PMT funciona en modo de contaje de fotones) o una corriente analógica (si el PMT funciona en modo analógico, también conocido como modo de corriente). El modo de contaje de fotones proporciona la mejor sensibilidad y es el mejor para la medición de luminiscencia, mientras que el modo analógico funciona mejor con altas intensidades de luz y es popular para las mediciones de fluorescencia.
Para captar la mayor cantidad posible de fotones, el PMT tiene que colocarse muy cerca de la muestra y en una posición optimizada que reduzca la pérdida de fotones procedentes de la muestra, pero que al mismo tiempo (en el caso de luminómetros de microplacas) excluya los fotones procedentes de pocillos adyacentes (crosstalk).
Además del PMT, otras partes importantes de un luminómetro son:
- La cámara oscura: el área donde se miden las muestras debe estar absolutamente protegida de la luz externa. Otro requisito de la cámara oscura es que tiene que ser adecuada para el formato de muestra a medir: tubos, placas u otros recipientes.
- Inyectores: no siempre son necesarios pero, como la luminiscencia es proporcionada por una reacción química, tienen que añadirse algunos reactivos a la muestra. Si la cinética de la reacción es lenta, los reactivos pueden añadirse manualmente, pero en el caso de reacciones de cinética rápida el uso inyectores de reactivos puede ser beneficioso (para controlar con precisión el tiempo entre la dispensación de reactivo y la medición) o incluso requerido (si la reacción dura sólo uno o unos pocos segundos).
La mayoría de los luminómetros no necesitan filtros o un monocromador, ya que la luz de todas las longitudes de onda se combina y se mide en conjunto. Sin embargo, algunos ensayos tales como BRET necesitan filtros para separar la luminiscencia emitida por diferentes proteínas en la muestra.
TIPOS DE LUMINÓMETROS
Una forma útil de clasificar los luminómetros es por el formato de muestra que miden, ya que esto tiene un impacto en el rendimiento, la flexibilidad, la confiabilidad y el precio.
Luminómetros de tubo
Los luminómetros de tubo pueden medir una muestra contenida en un tubo de luminiscencia, tubo de microcentrífuga o similar. Son instrumentos simples que miden las muestras una por una, que el operador debe insertar manualmente. Esto limita el rendimiento pero proporciona una alta sensibilidad y confiabilidad, ya que no hay compromisos en el posicionamiento del PMT.
Algunos luminómetros de tubo pueden estar equipados con inyectores, que se requieren para dispensar reactivos en ensayos flash (ensayos luminiscentes con cinética rápida).
Hay varios tipos de luminómetros de tubo:
Luminómetros de tubo de sobremesa
Son el tipo más sensible y confiable, pero son relativamente voluminosos y pesados y necesitan ser enchufados. Son el instrumento de elección para laboratorios con bajo número de muestras. El Sirius 2 LB 9526 y el Lumat LB 9510 son luminómetros de tubo de sobremesa de alto rendimiento.
Son lo bastante ligeros para ser transportados sin problemas y pueden funcionar con pilas para ser utilizados sobre el terreno. Son menos sensibles que los luminómetros de sobremesa, pero siguen ofreciendo un rendimiento suficiente para aplicaciones exigentes. El Junior LB 9509 es un excelente luminómetro portátil.
Luminómetros de mano
Pueden considerarse una subclase de los luminómetros portátiles. Son aún más pequeños y ligeros, pero tienen un rendimiento muy bajo y normalmente sólo se utilizan para ensayos cualitativos (por ejemplo, para discriminar si una superficie está contaminada o no). Como su principal aplicación es el control higiénico de las superficies, suelen utilizar bastoncillos especiales para la medición, que se utilizan para frotar la superficie a comprobar y se introducen directamente en el luminómetro para la medición.
Luminómetros de microplacas
Los luminómetros de placa (o de microplacas) miden muestras contenidas en los pocillos de microplacas, típicamente de 96 o 384 pocillos. Esto aumenta en gran medida el caudal de muestras que puede medirse en un tiempo determinado, pero hace que los instrumentos sean más complejos, ya que se debe implementar un sistema para mover la posición de medición de un pocillo a otro, y se debe bloquear la luz que proviene de pocillos adyacentes. Por lo tanto, son más caros que los luminómetros de tubo.
Aunque la sensibilidad de los luminómetros de placa es normalmente menor que la de los luminómetros de tubo de sobremesa, el Centro XS es el luminómetro de placa más sensible del mercado y tiene una sensibilidad comparable a la de un luminómetro de tubo.
Lectores multimodo
Los lectores de microplacas multimodo son lectores de microplacas que pueden medir la luminiscencia pero, además, pueden utilizar otras tecnologías de detección, como la fluorescencia y la absorbancia. Este aumento en la complejidad hace que sean necesarios algunos compromisos para equilibrar el rendimiento de todos los métodos de detección, pero proporciona una gran flexibilidad, incluida la posibilidad de usar filtros o, en algunos casos, monocromadores. Por lo general, son más caros que los luminómetros de microplaca, pero los lectores multimodo modulares como el Tristar 3 se adaptan a cualquier presupuesto.
Sistemas de Imágenes In Vivo
Si bien su principio de funcionamiento es muy diferente al de un luminómetro, los sistemas de imágenes in vivo también son un instrumento popular para medir la luminiscencia. Utilizan una cámara en lugar de un tubo fotomultiplicador; esto resulta en una menor sensibilidad, pero permite la localización espacial de la emisión de luz y la medición de la luminiscencia en animales vivos y plantas.
LUMINÓMETROS DESTACADOS DE BERTHOLD TECHNOLOGIES
Aquí tiene algunos ejemplos de nuestros mejores luminómetros en diferentes formatos: tubo, placa y lector multimodo. Para consultar nuestra gama completa, visite nuestras páginas Luminómetros de tubo y Lectores de luminiscencia de microplacas. Y, si necesita ayuda para elegir el mejor luminómetro para sus necesidades, contáctenos, ¡estaremos encantados de ayudarle!