RECETTORI ACCOPPIATI A PROTEINE G (GPCR)
Esistono diverse famiglie di recettori cellulari e la più grande è la famiglia dei recettori accoppiati a proteine G (GPCR). I GPCR sono coinvolti in molte funzioni e malattie cellulari, come il cancro o i disturbi neurologici. La trasduzione del segnale da parte di un GPCR inizia con una proteina G inattiva accoppiata al recettore. Una volta che il GPCR riconosce un ligando, la conformazione del recettore cambia per attivare le proteine G, provocandone la dissociazione dall'altro recettore e l'associazione con le proteine effettrici. L'interazione delle proteine G con il recettore o con le proteine effettrici può essere monitorata utilizzando BRET. Un test commerciale che migliora la sensibilità e l'affidabilità di BRET è NanoBRET™. Per saperne di più su come utilizzare questo strumento di analisi PPI in un lettore di micropiastre, scarica la nostra nota applicativa:
I GPCR attivano 2 principali vie di trasduzione del segnale: la via del cAMP e la via del fosfatidilinositolo. Uno strumento prezioso per lo studio di ciascuna via è la quantificazione delle sostanze prodotte dalla via. Sono disponibili test HTRF® per la quantificazione del cAMP, il secondo messaggero della via del cAMP, e dell'inositolo monofosfato, un metabolita stabile dell'inositolo trifosfato prodotto dalla via del fosfatidilinositolo. Il lettore multimodale Tristar 5 è compatibile con tutti i kit HTRF®.
ANALISI DEL GENE REPORTER
Un’importante risposta cellulare è la regolazione dell’espressione genica, ma l’espressione di molti geni è difficile da misurare perché non hanno un effetto visibile che possa essere quantificato. Uno strumento eccellente per studiare la regolazione dell'espressione genica è l'uso dei geni reporter. Il sistema Dual-Luciferase Reporter® (DLR™) è un sistema di geni reporter molto popolare che può essere misurato in modo ottimale in qualsiasi dei nostri lettori di micropiastre.
Nota applicativa del Tristar 3
Nota applicativa del Tristar 5
ATTIVITÀ DELLA PROTEIN CHINASI
Come accennato in precedenza, altre importanti risposte cellulari sono la regolazione delle interazioni proteina-proteina e dell'attività enzimatica. Entrambi possono essere regolati dalla fosforilazione delle proteine, che viene eseguita dalle proteine chinasi. L'attività delle proteina chinasi può essere monitorata misurando la concentrazione di ADP in una soluzione contenente la proteina chinasi di interesse. Il test Transcreener® ADP2 FI offre un modo molto conveniente, veloce e affidabile per quantificare l'ADP. Il Tristar 5 è un lettore certificato per la misurazione dei test Transcreener® FI.
Dual-Luciferase Reporter™, DLR® e NanoBRET™ sono marchi di fabbrica di Promega Corporation.
HTRF® è un marchio registrato di Cisbio Bioassays.
Transcreener® è un marchio registrato di Bellbrook Labs.