PRINCIPIO ALPHASCREEN®

AlphaScreen® si basa su biglie donatrici e accettori rivestite di idrogel che forniscono gruppi funzionali per la coniugazione a biomolecole. Le biglie si avvicinano quando le biomolecole interagiscono per legame molecolare, ad es. anticorpo-antigene o recettore-ligando. L'eccitazione laser a 680 nm di un fotosensibilizzatore presente sul cordone donatore provoca la produzione di singoletto d’ossigeno. Il singoletto d’ossigeno  migra per reagire con un rivestimento chemiluminescente sul cordone accettore. Il rivestimento chemiluminescente attiva quindi i fluorofori che emettono luce a 520 - 620 nm. Questa cascata di reazione si traduce in un'enorme amplificazione del segnale. La breve durata del singoletto d’ossigeno  in soluzione acquosa (~ 4 μs) consente la diffusione su una distanza fino a ~ 200 nm. Ciò significa che se le biglie del donatore e dell'accettore non sono in prossimità, non viene prodotto alcun segnale.

APPLICAZIONI ALPHASCREEN®

AlphaScreen® è un metodo omogeneo che è adatto per la miniaturizzazione e viene utilizzato nello screening per la scoperta di farmaci. Ha dimostrato di essere un metodo affidabile e sensibile in molti assay di rilevamento, tra cui:

  • Messaggeri secondari GPCR come AMP ciclico o IP3.
  • Assays enzimatici (chinasi, elicasi, proteasi, fosfatasi ...)
  • Immunoassays

AlphaScreen® Phosphotyrosine Assay with the Mithras² Validation of the Mithras² LB 943 Multimode Microplate Reader with the AlphaScreen® Phosphotyrosine (P-TYR-100) assay

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LETTORI PER MICROPIASTRE ADATTI PER ALPHASCREEN®

Un laser che emette a 680 nm è la sorgente di eccitazione richiesta e per le misure AlphaScreen® si consiglia una luminescenza ad alta sensibilità mediante filtri. Tutti i lettori di micropiastre riportati di seguito sono adatti per AlphaScreen®.

AlphaScreen® è un marchio registrato di PerkinElmer.