Paso 1 – Recubrimiento
ELISA comienza con una etapa de recubrimiento en la que la placa de ELISA (típicamente una placa de 96 o 384 pocillos) se trata con una solución de recubrimiento de antígeno o anticuerpo. El antígeno o anticuerpo se adsorbe en la superficie del pocillo de la placa de ELISA, creando la primera capa. A continuación, se retira el tampón de recubrimiento, seguido de una serie de lavados para eliminar el antígeno o anticuerpo no unido.
Los lavados se repiten entre cada etapa del ELISA para eliminar los materiales no unidos. Además, es esencial que se elimine el exceso de líquido para evitar la dilución de la solución añadida en la siguiente etapa de ensayo. Ofrecemos lavadores de microplacas especializados para garantizar la uniformidad.
Paso 2 - Bloqueo
En el segundo paso, todos los sitios de unión libres se bloquean usando un tampón que contiene proteínas no relacionadas con la proteína de interés. Este paso es importante para eliminar una fuente potencial de falsos positivos. La eliminación del tampón de bloqueo es seguida de nuevo por una serie de etapas de lavado.