Was ist Radio-HPLC (oder Radiochromatographie)?

Die Chromatographie ist eine Labormethode, die angewendet wird, um die verschiedenen Komponenten einer Mischung zu trennen. Das Gemisch wird in einem Flüssigkeit gelöst, die als mobile Phase bezeichnet wird, und trägt es durch eine Struktur, die ein anderes Material, die stationäre Phase, hält. Die verschiedenen Bestandteile des Gemisches bewegen sich mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten und trennen sich voneinander. Es gibt verschiedene Arten der Chromatographie; bei der Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie (HPLC) ist die mobile Phase eine Flüssigkeit mit hohem Druck (typischerweise 400 bar).

Um die Trennung des Gemisches zu messen, müssen seine Bestandteile in irgendeiner Weise nachweisbar sein. Es gibt keinen Universaldetektor, der alle Verbindungen überwachen kann. Daher müssen je nach den Eigenschaften der zu trennenden Substanzen unterschiedliche Arten von HPLC-Detektoren eingesetzt werden. UV-Detektoren werden häufig verwendet, da viele der in der HPLC aufgetrennten Substanzen typischerweise Licht im UV absorbieren. Es werden aber auch Detektoren, die Beugungsindex, Lichtstreuung, Fluoreszenz, Leitfähigkeit und anderes messen, in der HPLC eingesetzt. Die Intensität des gemessenen Signals wird in einer Grafik als sogenanntes Chromatogramm dargestellt: Bei vollständiger Trennung erscheint jede Verbindung im Chromatogramm als Peak. Der Zeitpunkt des Auftretens identifiziert die Verbindung, und die Fläche des Peaks quantifiziert sie. Bei der Radio-HPLC (oder Radiochromatographie) sind die zu trennenden Substanzen radioaktiv, in der Regel, weil sie mit einem radioaktiven Isotop, wie 125I, 14C oder 3H, markiert wurden. Dies macht den Einsatz eines Radioaktivitätsdetektors im HPLC-System erforderlich.

Anwendungen der Radio-HPLC

Es gibt zahlreiche Radio-HPLC Anwendungen in der Forschung, Diagnose, Qualitätskontrolle und anderen Bereichen. Einige wichtige Anwendungen sind:

  • H3: Pharmazeutische Analyse: Die Radio-HPLC ist eine Schlüsseltechnologie zur Trennung und Quantifizierung von radioaktiv markierten Medikamenten und mutmaßlichen Metaboliten in der Arzneimittelentwicklung.
  • H3: Umweltanalytik: Eine Vielzahl von Schadstoffen aus Quellen wie Industrieabfällen, Deponien, Pestiziden und Arzneimitteln können ihren Weg in die Umwelt finden. Die anspruchsvolle Identifizierung dieser Verunreinigungen erfordert hochempfindliche Detektoren, um selbst niedrigste Konzentrationen erkennen zu können.
  • H3: Entwicklung und QC von Radiochemikalien: Radiochemikalien sind nur so gut wie die Sorgfalt, die bei jedem Vorbereitungsschritt angewendet wird. Bei der Produktion sind strenge Vorschriften zu beachten.  Die radiochemische Reinheitsanalyse mittels Radio-HPLC ist oft erforderlich, um die Qualität der produzierten Radiochemikalien zu überprüfen.
  • H3: QC von radioaktiv markierten Antikörpern und Proteinen: Die radiochemische Identitäts- und Reinheitsanalyse von radioaktiv markierten Antikörpern und Proteinen mittels Radio-HPLC ist eine einfache und zuverlässige Methode, um sicherzustellen, dass nur der radioaktiv markierte Antikörper oder das radioaktiv markierte Protein in der QC-Probe vorhanden ist.

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